稻王分享常見填料的在位消毒和清洗方法

來源：http://www.funhappy.cn/   時間：2019-06-04   

色譜填料應用和保養很重要的是在位消毒和清洗,其中在位消毒可以將病原微生物的污染降低到極低水平,我們生活中常常用高溫消毒,但并不是所有的填料都能高溫消毒,例如FF系列的填料可以120℃ 20min,但是4B/6B的基球卻難以耐受高于45℃的溫度(長時間高于45℃會破壞填料).稻王分享常見填料的在位消毒和清洗方法.

通常用 0.5~1M NaOH 以合適的流速消毒 1~2 個小時，在位清洗是清除填料或柱子中的沉淀及未洗凈物質，一般填料用 10 次后至少需要做 1 次這樣的操作，具體操作和在位消毒一樣，做在位清洗或消毒都可以互相代替，無須做兩步都做。

具體方法為：

1.離子交換，凝膠過濾，疏水色譜填料可以用 1M以 NaOH以 30cm/h反向沖洗 3~5 個柱床體積，然后再用 3~5 個柱床體積的平衡緩沖液再生即可。

2.去除疏水性強的雜質一般方法是先用純水洗 3 個柱床體積，然后再用 70%的乙醇或 30%的異丙醇含 0.5%的 Triton 或吐溫洗 5~10個柱床體積，然后用純水洗 3~5 個柱床體積即可。對于離子交換柱子上吸附的色素可以用 0.2~0.5M 醋酸洗 3~5 個柱床體積。

3.此外也可以采用 6M 鹽酸胍洗去一些因為氫鍵而聚集的雜質（多糖核酸等），通常也洗 5-10 個柱體積。

4.對于親和填料中的小分子的配基如 GST 瓊脂糖凝膠、IDA/NTA 瓊脂糖凝膠、賴氨酸瓊脂糖凝膠、藍色瓊脂糖凝膠、肝素瓊脂糖凝膠、苯甲脒瓊脂糖凝膠可以采用以上的方法進行位消毒和清洗。

注意：大多填料的壽命下降不是因為配基脫落，而是雜質包裹或者吸附牢固導致填料可用功能基團減少而載量效率下降，因此只要處理得當是可以延長填料的壽命的，這對降低工業用戶填料成本有很重要的意義。

大多數填料的壽命下降不是因為配給脫落，而是雜質包裹或者吸附牢固導致填料可用功能集團減少而載量效率下降，因此只要處理得當是可以延長填料的壽命的。這對工業用戶填料成本有很重要的意義。